一、 仪器介绍

实验目的：

本试验是一项生殖细胞致突变试验,用来检测受试物对整体哺乳动物生殖细胞的遗传损伤,进一步确证体外试验或其他试验系统获得的阳性结果,以评价受试物能否引起显性致死突变。

实验概述：

哺乳动物发育中的精子在物理或化学因素作用下,发生染色体损伤,从而使受精卵在发育中死亡引起显性致死的染色体损伤主要为染色体断裂。显性致死的主要表现是受精卵着床前丢失或着床后胚

胎早期死亡。通过适当的途径使雄性动物接触受试物,然后与未经染毒且未交配过的雌性动物交配,交配结束后,取出雌性动物。雌性动物于妊娠后半期处死,剖开腹腔,取出子宫,检査两侧子宫内的胚胎植入数着床数、早死胎、晚死胎和活胎数。雄性动物每间隔一定时间再与另一批未经染毒且未交配过的雌性动物交配,如此共进行数批,以保证覆盖一个精子周期。

应用范围

应用于科研、农业、卫生、教育、雾霾状态可吸入颗粒染毒效果研究等各个领域

符合标准：

GB/T 15670.18-2017《农药登记毒理学试验方法第18 部分:啮齿类动物显性致死试验》

二、试验流程

1实验动物：

物种: 通常选用性成熟的健康雄性大鼠或小鼠如SD大鼠、CD-1小鼠

数量: 每组至少15只雄鼠，设多个剂量组和阴性/阳性对照组。

雌鼠: 需未交配过的健康雌鼠，用于与雄鼠交配。

2给药剂量分组:

至少设3个剂量组，高剂量应出现轻微毒性如体重减轻。

阴性对照组如体重减轻溶剂对照和阳性对照组如环磷酰胺、丝裂霉素C等已知致突变剂

给药方式:通常为经口灌胃，连续给药5~7天覆盖精子发生周期不同阶段

3交配程序

交配安排:雄鼠给药后，按周次与未处理雌鼠交配每周更换一批雌鼠，共5~6批，以覆盖精子发生全周期精原细胞一精子。

交配比例:通常1雄:2雌，每日检查阴栓交配证据

4观察指标：

胚胎存活分析

雌鼠妊娠中期解剖，计数黄体数、着床数、活胎数和死胎数。

计算显性致死率:

其他指标: 雄鼠体重、睾丸重量、精子质量等,

5结果评价：

阳性结果:显性致死率显著升高如剂量依赖性增加，或某批交配周期异常，提示受试农药可能诱发生殖细胞遗传损伤。

阴性结果:需结合其他遗传毒性试验综合评估，